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分光光度計校準的主要原因是儀器本身性能帶來的各種不定因素對分析結果產生影響。例如，單色器透光率、光源輻射強度、檢測器靈敏度等因素都會影響測量結果。特別是在工作波段邊緣波長處，由于雜散光的影響，測量誤差更為顯著，可能導致測量結果低于真實值。